申請PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝轉(zhuǎn)染步驟
材料:質(zhì)粒DNA指數(shù)生長的真核細(xì)胞PEI(聚乙烯亞胺)1×HBS(pH7.4)配方:PEI儲存液(100μM):稱取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS(pH7.4)中,0.2μm濾膜過濾,儲存于4℃?zhèn)溆谩?×HBS(pH7.4):將8.76gNaCl溶解于900ml超純水,加入20ml1M的HEPES,調(diào)pH值到7.4,定容至1L,過濾(0.2μm濾膜)后儲存于4℃?zhèn)溆?。方法?.細(xì)胞分盤:通過胰酶消化收集細(xì)胞,用適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基以4×105至8×105細(xì)胞/cm2的密度平鋪細(xì)胞于60mm組織培養(yǎng)皿上(根據(jù)實驗需要選擇培養(yǎng)皿,使細(xì)胞貼壁后所占總面積達(dá)到培養(yǎng)皿面積的70-90%)。根據(jù)細(xì)胞貼壁情況于含5%CO2的37℃溫箱中孵育8-24h,當(dāng)細(xì)胞貼壁完全后即可開始轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染前換入2mL預(yù)熱的無血清培養(yǎng)基。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品技術(shù)問題,歡迎咨詢上海曼博生物。如想申請PEI試用裝,請關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”,即可參加!哪個品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑質(zhì)量好?申請PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝轉(zhuǎn)染步驟
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染方法:1.接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前一晚,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細(xì)胞并計數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,每個孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。2.準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,每一批轉(zhuǎn)染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。更多關(guān)于Polysciences PEI相關(guān)內(nèi)容歡迎咨詢上海曼博生物!如想申請PEI試用裝,請關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”,即可參加!?全球PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝幫助用戶更好地了解PEI轉(zhuǎn)染試劑的操作流程分子量為25000的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑即Polysciences23966轉(zhuǎn)染效率比較高.
1.對于某些類型的細(xì)胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細(xì)胞,在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,可適當(dāng)降低鋪板密度,以確保轉(zhuǎn)染時細(xì)胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細(xì)胞,可適當(dāng)降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞,但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到*轉(zhuǎn)染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。4.對大多數(shù)細(xì)胞來而言,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化。更多關(guān)于PEI轉(zhuǎn)染試劑相關(guān)產(chǎn)品技術(shù)問題,歡迎咨詢上海曼博生物。?如想申請PEI試用裝,請關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”,即可參加!
1.對于某些類型的細(xì)胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細(xì)胞,在轉(zhuǎn)染前兩天鋪板可顯著提高轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)水平。如果選擇轉(zhuǎn)染前兩天鋪板,可適當(dāng)降低鋪板密度,以確保轉(zhuǎn)染時細(xì)胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細(xì)胞,可適當(dāng)降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復(fù)合物仍能轉(zhuǎn)染細(xì)胞,但是DNA-PEI復(fù)合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達(dá)到*轉(zhuǎn)染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉(zhuǎn)染試劑的兼容性。4.對大多數(shù)細(xì)胞來而言,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉(zhuǎn)染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行優(yōu)化。?如想申請PEI試用裝,請關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”,即可參加!?哪個品牌的PEI轉(zhuǎn)染試劑性價比較高?
PEIMAX是一款高度濃縮的粉劑,大量科學(xué)家選擇PEIMAX,在內(nèi)部自行制備低成本高效益的PEI轉(zhuǎn)染試劑。多年以來,經(jīng)過眾多業(yè)內(nèi)人士評審的公開研究和出版文獻(xiàn)表明,在HEK293、CHO和Sf9系統(tǒng)中可獲得很高的轉(zhuǎn)染效率,在重組抗體和病毒載體生產(chǎn)中穩(wěn)定性高,可靠性強。PEIMAX是一種非GMP等級PEI轉(zhuǎn)染試劑,適用于基礎(chǔ)科學(xué)研究及藥物研發(fā)早期階段。Transporter5轉(zhuǎn)染試劑是一種即用型線性聚乙烯亞胺轉(zhuǎn)染試劑(PEI)衍生物。由PEIMAX配置而成的即用型無菌試劑,采用0.1μmPES無菌過濾器,完全消除支原體污染風(fēng)險。適用于工藝開發(fā)、臨床前和早期臨床研究,可無縫過渡到MAXgene用于cGMP生產(chǎn)。如想申請PEI試用裝,請關(guān)注我們的公眾號:Mine-bio,回復(fù)關(guān)鍵詞“PEI申請”,即可參加!轉(zhuǎn)染效率好的PEI轉(zhuǎn)染試劑是哪個品牌?天津高實用性PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝
MAXgene GMP是一種cGMP級PEI轉(zhuǎn)染試劑。申請PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝轉(zhuǎn)染步驟
接種細(xì)胞:轉(zhuǎn)染前,用膠原酶消化細(xì)胞并計數(shù)(不建議用胰酶)。調(diào)整細(xì)胞濃度,將細(xì)胞鋪入細(xì)胞培養(yǎng)的器皿,總體積如表1所示,每個孔置入的細(xì)胞量應(yīng)能使轉(zhuǎn)染時細(xì)胞匯合度達(dá)到70~80%。準(zhǔn)備DNA-PEI復(fù)合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進(jìn)行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用2-5μL線性PEI轉(zhuǎn)染試劑。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉(zhuǎn)染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復(fù)合物。當(dāng)溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如Falcon5mL/14mL離心管。轉(zhuǎn)染細(xì)胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復(fù)合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉(zhuǎn)染時,去除生長培養(yǎng)基,替換成無血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復(fù)合物。轉(zhuǎn)染3h后,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。孵育細(xì)胞和分析結(jié)果:在CO2培養(yǎng)箱中37℃下孵育細(xì)胞至可以分析檢測。轉(zhuǎn)染后快7h即可檢測到轉(zhuǎn)入基因的表達(dá)。請自行確定檢測時間。更多關(guān)于Polysciences PEI相關(guān)內(nèi)容歡迎咨詢上海曼博生物!近期還可申請PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝!申請PEI轉(zhuǎn)染試劑試用裝轉(zhuǎn)染步驟
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浙江固廢干粉給料系統(tǒng)
它具有體積小、噪音低、重量輕、工作頻率高、功耗低、進(jìn)給無級調(diào)節(jié)、安裝維護(hù)方便等特點,可用于生產(chǎn)過程的自動控制,實現(xiàn)生產(chǎn)過程的自動化。在一般生產(chǎn)過程中,給料設(shè)備不會被故障淹沒,但是一旦發(fā)生故障不能及時解 。
光伏組件封裝設(shè)備的清潔方法可以根據(jù)具體情況采取以下步驟:常規(guī)清潔:使用干燥的專業(yè)拖把清掃光伏組件表面的附著物,如干燥浮灰、樹葉等。對于緊附于玻璃上的硬性異物如泥土、鳥糞等,可以使用稍硬刮板或紗布進(jìn)行刮 。
專升本考的是毅力和自律性,如果你夠努力,那六個月就足夠;如果你三天打魚兩天曬網(wǎng),那可能至少提前一年準(zhǔn)備?!眲偵洗笠坏耐瑢W(xué)還可以不用太著急,如果有升本的想法,可以提前了解一些政策信息,偶爾記下單詞。大二 。
垃圾分類房是一種專門用于垃圾分類處理的場所,具有以下作用:1、減少污染:垃圾處理多采用衛(wèi)生填埋甚至簡易填埋的方式,占用上萬畝土地;并且蟲蠅亂飛,污水四溢,臭氣熏天,嚴(yán)重污染環(huán)境。土壤中的廢塑料會導(dǎo)致農(nóng) 。
任何連接器在工作時都離不開電流,這就存在起火的危險性·因此對連接器不僅要求能防止引燃還要求在一旦引燃和起火時,能在短時間內(nèi)自滅·在選用時要注意選擇朵用阻燃型,自熄性絕緣材料的電連接器。機械參數(shù)單腳分離 。
通風(fēng)柜驗收標(biāo)準(zhǔn):1、通風(fēng)柜各個配件安裝要嚴(yán)密、準(zhǔn)確、牢固,接頭不得有松動痕跡,應(yīng)詳細(xì)檢查不得有缺件,可多不可少。2、通風(fēng)柜安裝完工應(yīng)檢查放置是否平穩(wěn),墊腳高度是否合適,是否有足夠的放置空間。3、通風(fēng)柜 。
pcba防潮涂層的應(yīng)用范圍非常普遍,幾乎涵蓋了所有電子產(chǎn)品的制造過程。例如,手機、平板電腦、電視機、電腦主板、汽車電子、醫(yī)療設(shè)備等等,都需要使用pcba防潮涂層進(jìn)行保護(hù)和防護(hù)。特別是在高濕度、高溫度、 。
防火墻的結(jié)構(gòu)通常由以下幾部分組成:1. 墻體:防火墻的主體部分是墻體,墻體通常由磚、混凝土等材料構(gòu)成,其厚度和高度根據(jù)建筑物的不同需求而定。2. 防火門:防火門是防火墻的重要組成部分,它可以有效地防止 。
上海裕航的食品金屬探測機實現(xiàn)高穩(wěn)定性的方式主要有以下幾點:采用先進(jìn)的數(shù)字信號處理技術(shù)DSP),對金屬探測信號進(jìn)行高精度處理和分析,避免了傳統(tǒng)模擬信號處理方法的誤差和不穩(wěn)定因素,提高了設(shè)備的穩(wěn)定性和靈敏 。
華創(chuàng)自動噴砂機特點:1、操作簡單,效率較高,可根據(jù)不同的工藝要求更換不同粒度的砂料,砂料自動循環(huán)使用,節(jié)約成本。2、工件輸送速度根據(jù)工件的工藝參數(shù)可無級調(diào)速,達(dá)到滿意的噴砂效果。3、工件自動進(jìn)入噴砂區(qū) 。
乳腺防輻射群防輻射鉛衣采用先進(jìn)的材料和工藝制作而成,主要由鉛和其他金屬材料制成。鉛是一種高密度的金屬材料,具有很強的輻射吸收能力。通過在鉛衣內(nèi)部填充一定厚度的鉛片,可以有效地阻擋射線穿透到人體,從而保 。