與正常細胞相比，中流細胞外泌體的分泌量增多，內(nèi)容物也存在明顯差異。由于囊泡結(jié)構(gòu)的保護，中流細胞來源的外泌體內(nèi)攜帶有大量中流細胞來源的活性生物分子，其特點包括:(1)提供具有穩(wěn)定構(gòu)象的蛋白質(zhì)分子;(2)保持蛋白質(zhì)的生物活性;(3)攜帶其中的生物分子經(jīng)體液運輸至遠端qi官;(4)膜融合的作用方式使得中流細胞來源的外泌體能夠與靶細胞之間進行更有效的信息交流。外泌體介導(dǎo)中流轉(zhuǎn)移:體外研究和體內(nèi)成像實驗表明惡性中流細胞產(chǎn)生的外泌體可以在全身水平上被同一中流或遠端中流中惡性程度較低的ai細胞攝入，其內(nèi)所包含的與轉(zhuǎn)移相關(guān)的mRNAs進入轉(zhuǎn)移性較低的細胞后，能夠增強其轉(zhuǎn)移能力?；顑?nèi)的外泌體動態(tài)（哪個外泌體遷移至何處）也會成為今后需要努力研究的重要課題。北京外泌體WB

外泌體在神經(jīng)系統(tǒng)中與神經(jīng)回路的控制相關(guān)，同時各種神經(jīng)退行性疾病的致病蛋白還可以通過外泌體釋放到細胞外并傳遞到其他細胞，與病情發(fā)展密切相關(guān)。病細胞釋放的外泌體含有許多與血管新生和免疫逃逸相關(guān)的分子，構(gòu)建適合病細胞生長的微環(huán)境，促進病細胞的發(fā)展。另外，病細胞來源的外泌體上粘著分子的表達形式?jīng)Q定著癥狀向身體部位的轉(zhuǎn)移途徑。近，有報告指出脂肪細胞釋放的外泌體對肝臟的遺傳基因表達有控制作用。許多病毒利用外泌體的產(chǎn)生路徑傳播細胞，受病毒傳播的細菌和寄生蟲通過外泌體控制其他受細胞傳播的細菌、寄生蟲的活動。河南CD81外泌體慢病毒外泌體是細胞在特定條件下分泌的小囊泡，是細胞間傳遞信號，相互溝通和影響的重要工具。

細胞分泌外泌體的過程一般分為三個階段:(1)質(zhì)膜內(nèi)陷,形成早期內(nèi)吞小泡;(2)內(nèi)吞小泡向內(nèi)萌發(fā)成熟,形成多囊泡體;(3)多囊泡體與質(zhì)膜融合,并釋放出囊泡內(nèi)容物,形成外泌體。外泌體具有獨特的理化性質(zhì),其密度為1.13~1.19g/mL,由平均厚度小于5nm的雙層脂膜所包裹,具有典型杯狀形態(tài),呈現(xiàn)為扁平球形。外泌體表面富含多糖鏈,其質(zhì)膜主要由溶血磷脂酸、磷脂酰絲氨酸、膽固醇、神經(jīng)酰胺和鞘磷脂構(gòu)成,另有與細胞來源相關(guān)的部分特殊脂類。外泌體可攜帶蛋白質(zhì)、核酸和脂質(zhì)等生物活性大分子,其中主要為蛋白質(zhì),且大部分蛋白為所有來源外泌體所共有,只有小部分與其來源有關(guān),為其分泌細胞的特有蛋白,能夠反映分泌細胞的類型和生理病理狀態(tài)。除此之外,外泌體可攜帶大量mRNA和miRNA等核酸,并將其運輸?shù)桨屑毎?發(fā)揮相應(yīng)的生物學(xué)功能。

目前，提取外泌體的方法主要有超速離心法、PEG沉淀法，但這些方法混有非常多的雜質(zhì)，必須慎重分析得到的是否是外泌體。超速離心法存在操作繁雜、回收量不穩(wěn)定，不能用于定量分析、必須使用昂貴的超速離心機、無法進行多樣品分析等問題。因此外泌體研究相對困難，需要盡快開發(fā)操作簡單、可提取高純度外泌體的技術(shù)。因此，日本和光著眼于巨噬細胞的外泌體受體Tim4蛋白，制備Tim4細胞外域與磁珠結(jié)合的“Tim4磁珠”。Tim4通過磷酯酰絲氨酸（PS）法特異性結(jié)合Tim4蛋白和磁珠，再經(jīng)過含有EDTA的洗脫緩沖液進行分離，提取高純度的完整外泌體。外泌體及活性蛋白能直接穿透皮膚間隙，快速直達基底層起效。

妊娠期間胎盤可釋放外泌體到全身循環(huán)系統(tǒng)，參與妊娠期間母胎界面的免疫調(diào)節(jié)、子宮螺旋動脈重塑和胎盤屏障的形成等重要事件調(diào)控，在正常妊娠過程維持中發(fā)揮重要作用。而很多妊娠并發(fā)癥，如子癇前期等胎盤功能紊亂相關(guān)疾病的發(fā)生，很可能與胎盤來源外泌體異常密切相關(guān)。目前外泌體分離方法主要包括：多步差速離心、蔗糖密度梯度離心、試劑盒沉淀、免疫磁珠分選、色譜法、過濾離心等方法。其中，多步差速離心是制備外泌體的經(jīng)典方法，該方法是根據(jù)外泌體的沉降系數(shù)差速離心將其分離出來，然而妊娠期母血清中除含有胎盤組織釋放的外泌體，還包括許多其他種類細胞釋放的外泌體，如樹突狀細胞、淋巴細胞等，且血清中可能還存在一些大小類似的物質(zhì)混雜其中，這些因素都會影響胎盤來源外泌體的分離純化。應(yīng)用Tim4的外泌體強結(jié)合能力，可用ELISA或FACS高靈敏度定性檢測、定量分析外泌體。細菌外泌體提取試劑盒成分

外泌體具有檢測包括病癥在內(nèi)的許多病理狀況的潛力，可用于對心血管疾病和病癥等多種疾病的診斷和監(jiān)測。北京外泌體WB

外泌體有很多潛在優(yōu)勢，但是外泌體在藥物遞送中的應(yīng)用研究才剛剛起步，尚有許多問題需解決：如何修飾外泌體的靶向性：缺氧瘤細胞來源的外泌體傾向于向缺氧瘤組織內(nèi)募集；此外，還可通過在外泌體膜表面設(shè)計與靶細胞特異性結(jié)合的抗體、配體或受體來實現(xiàn)。如何提高藥物裝載效率：目前主要有①前裝載方法（首先將藥物加載到母細胞中，隨后外泌體形成并包裹藥物分泌到細胞外，常用的方法如轉(zhuǎn)染、共孵育等）；②后裝載方法（直接將藥物加載到外泌體中，例如孵育、電穿孔、超聲、擠出、凍融循環(huán)等）；③其他裝載方法（主要是通過生物工程修飾母細胞來實現(xiàn)）。如何實現(xiàn)外泌體的大量生產(chǎn)：目前大規(guī)模生產(chǎn)外泌體的方法主要是自發(fā)生產(chǎn)和非自發(fā)生產(chǎn)。北京外泌體WB

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